Cre(Cyclization Recombination Enzyme,即环化重组酶)是细菌噬菌体P1的I型拓扑异构酶。该酶无需能量辅助因子,即可介导两个LoxP位点(序列)之间的特异性重组,导致 LoxP位点间的基因序列产生缺失、易位等现象。由于其作用方式高效简单,Cre/LoxP 定位 重组系统已在特定基因的删除、基因功能的鉴定、外源基因的整合、基因捕获及染色体工程 等方面得到了有效的应用。
pGMLV-CMV-CRE-ZsGreen1-Puro Lentivirus慢病毒质粒是以CMV作为启动子,启动外源基因CRE的表达,EF1启动绿色荧光蛋白(ZsGreen1)和嘌呤(Puro)抗体的表达,通过T2A连接。采用慢病毒的优点在于它能够感染多种难感染的细胞,比如原代细胞,干细胞,神经元细胞等。同时,慢病毒可以将携带的外源基因插入细胞的基因组中,进行长时间的表达。